非洲猪瘟病毒P72蛋白单克隆抗体的制备及抗体检测方法的建立
作 者 : 朱红
学位授予单位 : 扬州大学
学位名称 : 硕士
外文题名 : Development of Monoclonal Antibody Against the VP72 Protein and Establishment of an Indirect ELISA for Detection of African Swine Fever Virus-Specific Antibodies
导师姓名 : 孙怀昌
学位年度 : 2007
关键词 : 非洲猪瘟病毒；单克隆抗体；间接ELISA
摘 要 : 非洲猪瘟(African Swine Fever, ASF)是由ASF病毒(ASFV)引起的猪的急性、烈性传染病,以全身出血、呼吸障碍和神经症状为主要特征,强毒株感染的发病率和死亡率可达100%,对养猪业危害巨大,是各国严密防范的传染病。目前我国尚无本病的发生,但随着国际贸易的增强,国家间人员的流通,在国际机场和港口等地点应严防该病的传入,因此事先建立快速诊断方法十分必要。VP72是ASFV主要的衣壳蛋白,占病毒粒子蛋白含量的32%,非洲猪瘟病毒是有限的几个不能引起中和反应的病毒之一,但存在针对VP72的中和抗体。并且该蛋白在不同毒株之间高度保守,是诊断ASF最常用的目标抗原。因此通过主要衣壳蛋白VP72建立一种ASF的诊断方法具有可行性。单克隆抗体特异性强,被认为是鉴定病毒因子的可靠方法,与多抗相比,单抗纯度高,专一性强、重复性好、且能持续地无限量供应,已用于多种病毒感染的诊断。为了制备特异的单克隆抗体,本研究使用重组大肠杆菌表达的GST-VP72融合蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,三次免疫后取脾脏B细胞与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞进行融合,以纯化的可溶性GST-VP72S为包被…
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